Двенадцать пациентов, инфицированных вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) и с количеством клеток CD4 ниже 100 клеток/микролитр, получали флуконазол ежедневно (200 мг, пять пациентов) или еженедельно (400 мг, семь пациентов) для профилактики грибка в течение 6-месячного периода.
Мазки из ротоглотки брали через регулярные промежутки времени, чтобы обнаружить колонизацию Candida sp.
Все изоляты дрожжей исследовали на предмет развития с течением времени устойчивости к флуконазолу.
Генетическое разнообразие среди штаммов оценивали для того, чтобы различать отбор штаммов. резистентный субклон и реколонизация пациента.
Генотипирование проводили путем анализа случайной амплификации полиморфной ДНК (RAPD).
Полиморфизмы конкретных сайтов анализировали путем отслеживания вариабельности длины в нескольких микросателлитных локусах.
Наконец, чтобы максимизировать разрешение, один из этих локусов (ERK1) был проанализирован с помощью нуклеотидного секвенирования.
Хотя количество проанализированных штаммов было слишком мало для статистической проверки, оказалось, что при еженедельном приеме флуконазола меньшая часть штаммов проявляла пониженную чувствительность, чем при приеме dail.
Генетический анализ позволил выделить три различных сценария.
Развитие резистентности в остальном, по-видимому, неизмененном штамме наблюдалось у 1 из 12 пациентов.
Явная замена штамма наблюдалась у 3 из оставшихся 11 пациентов.
У всех остальных пациентов наблюдались незначительные различия в либо генотип RAPD, либо состав аллелей микросателлитов во время курса лечения.
В целом данные о последовательности микросателлитов согласуются с данными, полученными другими методами, но иногда отмечается гетерогенность внутри пациента.
Настоящие результаты показывают, что во время лечения флуконазолом колонизирующие штаммы могут оставаться идентичными, заменяться явно отличающимися штаммами или претерпевать небольшие изменения.
У каждого пациента могут быть разные уровни внутриклеточных вариаций.
Авторы исследования: D Metzgar, A van Belkum, D Field, R Haubrich, C Wills
Отзывы пациентов на fluconazole