Платформа жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии с высоким разрешением использовалась для одновременного качественного и количественного (QUAL/QUAN) сбора данных, что позволило исследовать метаболизм лекарств и метаболомику.
Образцы плазмы крови контролировались для трех разных групп пациентов в один и тот же момент времени (через 1 ч после введения препарата): одна группа получала ацетаминофен (APAP), одна группа получала как APAP, так и кеторолак, и одна группа была контрольной группой.
Количественное определение APAP и двух его метаболитов (APAP-глюкуронида и APAP-цистеина) проводили с использованием квадрупольного времени пролета с быстрым получением (рабочий цикл 50-100 мс, разрешающая способность 30 000), совместимого с ограничением времени UHPLC.
Мониторинг выбранных реакций с высоким разрешением использовался для количественного определения APAP и его метаболитов от 50 до 10 000 нг/мЛ с использованием аликвоты в 50 мкл плазмы.
Средние измеренные концентрации составили для APAP 6650 нг/мл против 6160 нг/мл, APAP-Концентрации CYS составили 154,2 нг/мл против 140,6 нг/мл, а концентрации APAP-GLU – 8 750 нг/мл против 8430 нг/мл между группой, которая получала только APAP (n = 11), и группой, которая получала APAP в комбинации с кеторолаком (n = 11). Между двумя группами пациентов не наблюдалось существенных различий, как и следовало ожидать, из-за различий в пути метаболизма обоих веществ.
Для качественного аспекта к исследуемым образцам была применена платформа обработки данных метаболомики с биологическими образцами контроля качества для поиска непредвиденных метаболитов и биомаркеры, связанные с метаболизмом APAP и кеторолака.
Многомерный анализ (т.е. анализ основных компонентов), инструменты группировки переменных (т.е.
PCVG) и MS-спектры высокого разрешения (/MS) из стратегии сбора MS(ALL) позволили профилировать и охарактеризовать циркулирующие метаболиты APAP в плазме, таких как АПАП-сульфат, АПАП-меркаптурат, а также кеторолак.
Авторы исследования: David Tonoli, Emmanuel Varesio, Gérard Hopfgartner