Цель исследования — изучить защитный эффект нокдауна пропротеин-конвертазы субтилизин/кексин типа 9 (PCSK9) на эндотелиально-мезенхимальный переход (EndoMT), индуцированный β-глицерофосфатом, дексаметазоном и L-аскорбиновой кислотой в эндотелиальных клетках аорты человека (HAECs). Методы Модель EndoMT была создана путем индуцирования HAEC (0, 10, 30, 50) ммоль/л β-глицерофосфата в сочетании со 100 нмоль/л дексаметазона и 50 мкг/мл L-аскорбиновой кислоты aci.
HAEC трансфицировали специфической малой интерферирующей РНК PCSK9 (si-PCSK9), а уровни экспрессии мРНК и белка PCSK9 в HAEC были обнаружены с помощью количественной ПЦР в реальном времени и вестерн-блоттинга.
HAEC были рандомизированы в пустую группу, группу EndoMT, группу EndoMT, трансфицированную отрицательной контрольной малой интерферирующей РНК (si-NC), и группа EndoMT, трансфицированная si-PCSK9. Уровни мРНК α-гладкомышечного актина (α-SMA), фибробластспецифического белка 1 (FSP1) и эндотелиального кадгерина сосудов (VE-кадгерина) определяли с помощью количественной ПЦР в реальном времени, уровни белка α-SMA и VE-кадгерина определяли с помощью вестерн-блоттинга, и экспрессию α-SMA определяли с помощью иммунофлуоресцентного окрашивания.
Результаты 30 ммоль/л β-глицерофосфата оказывали наилучший эффект при индукции ЭндоМТ, а экспрессия мРНК и белка PCSK9 повышалась при возникновении ЭндоМТ.
После PCSK9 нокдаун, экспрессия α-SMA и FSP1 была понижена, в то время как экспрессия VE-кадгерина была повышена.
Заключение Нокдаун PCSK9 ингибирует EndoMT HAECs.
Авторы исследования: Tianhui Jin, Liang Chen, Yehong Liu, Ying Sheng, Yuting Zhou, Shiyi Xuan, Gangjun Zong
Отзывы пациентов на dexamethasone